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明確研究目的
確定研究目標（如病原體致病性、免疫應答、治療評估等）。
選擇適合的病原體（病毒、細菌、寄生蟲、真菌等）。
選擇大鼠品系和年齡
品系：SD（Sprague-Dawley）、Wistar大鼠常用；免疫研究可選LEWIS或F344等近交系。
年齡/體重：根據實驗需求選擇幼鼠（免疫發育）、成年鼠（標準模型）或老年鼠（衰老免疫研究）。
SPF級動物：確保無特定病原體干擾實驗結果。
病原體選擇與制備
確定病原體株（如流感病毒H1N1、結核分枝桿菌H37Rv等）。
測定病原體滴度（如病毒TCID50、細菌CFU），確保接種劑量準確。
根據病原體特性選擇感染方式：
呼吸道感染（如流感病毒、結核桿菌）
鼻內滴注：麻醉后滴入病原體懸液。
氣溶膠暴露：使用霧化裝置模擬自然感染。
消化道感染（如腸道病原體）
灌胃：直接注入胃內。
口服感染：通過飼料或飲水（需控制攝入量）。
注射感染
腹腔注射（IP）：適用于全身性感染模型（如敗血癥）。
靜脈注射（IV）：用于血液或器官靶向感染。
皮下/肌肉注射：局部感染或疫苗研究。
其他途徑
創傷感染（皮膚傷口模型）、顱內注射（神經感染模型）等。
預實驗確定劑量
通過梯度劑量測試，選擇能引起典型癥狀但不致死的中等劑量（如LD50的10-50%）。
參考文獻或預實驗數據優化。
感染后監測
臨床癥狀：體重、活動度、毛發狀態、呼吸頻率等。
病原學檢測：qPCR、培養法檢測組織載量（如肺、肝、脾）。
免疫指標：ELISA檢測血清抗體/細胞因子，流式細胞術分析免疫細胞亞群。
病理學：解剖觀察病變，HE染色分析組織損傷。
陰性對照：PBS或培養基處理的假感染組。
陽性對照：已知致病株或標準治療藥物組（如抗生素治療組）。
空白對照：未處理健康大鼠。
生物安全
根據病原體等級（BSL-1/2/3）選擇對應實驗室，遵守防護規范。
廢棄物需高壓滅菌處理。
倫理審批
實驗方案需通過動物倫理委員會審查（遵循3R原則）。
標準化操作
統一感染時間、環境條件（溫度、濕度、光照周期）。
避免應激（如頻繁抓取）。
數據分析
記錄感染后時間點的動態變化（如病毒載量峰值、抗體產生時間）。
使用統計方法（如t檢驗、ANOVA）比較組間差異。
感染失敗：檢查病原體活性、接種劑量或操作誤差。
高死亡率：降低接種劑量或調整大鼠品系（如改用免疫缺陷鼠）。
個體差異：增加樣本量（每組至少6-8只）。
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